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乳酸脱氢酶检测

乳酸脱氢酶检测

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乳酸脱氢酶检测的临床应用与标准化流程

简介

乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase, LDH)是一种广泛存在于人体组织细胞中的关键酶类,主要参与糖酵解和糖异生过程,催化乳酸与丙酮酸之间的可逆转化。当细胞因缺氧、炎症、坏死或肿瘤等原因发生损伤时,LDH会释放到血液中,导致血清LDH活性升高。因此,LDH检测成为临床评估组织损伤程度、疾病进展及预后的重要指标。近年来,随着检验技术的进步,LDH检测在心血管疾病、肿瘤筛查、肝病诊断等领域中的应用价值日益凸显。

检测的适用范围

  1. 心肌损伤评估:急性心肌梗死(AMI)患者发病后12-24小时血清LDH水平显著升高,且持续时间较长(7-14天),适用于延迟就诊患者的辅助诊断。
  2. 肝脏疾病监测:肝炎、肝硬化或肝癌患者中,肝细胞破坏导致LDH5同工酶升高,结合ALT、AST等指标可提高诊断准确性。
  3. 血液系统疾病筛查:溶血性贫血、白血病等疾病常伴随LDH水平异常,尤其是LDH1和LDH2的升高与红细胞破坏密切相关。
  4. 肿瘤诊疗管理:部分恶性肿瘤(如淋巴瘤、生殖细胞肿瘤)患者LDH水平升高,可作为疗效监测和预后评估的生物学标志物。
  5. 其他应用:包括肌肉损伤(如横纹肌溶解症)、肺栓塞、肾脏疾病等,也可通过LDH检测提供辅助诊断信息。

检测项目及简介

  1. 总LDH活性检测 通过测定血清或血浆中LDH的总活性,反映全身性组织损伤程度。该检测快速、经济,但特异性较低,需结合其他指标综合分析。

  2. LDH同工酶分析 LDH由两种亚基(H型和M型)组成,形成5种同工酶(LDH1-LDH5)。不同组织来源的同工酶分布特征显著:

    • LDH1(H4):心肌、红细胞
    • LDH2(H3M):心肌、肾脏
    • LDH3(H2M2):肺、淋巴细胞
    • LDH4(H1M3):肝脏、骨骼肌
    • LDH5(M4):肝脏、骨骼肌 通过电泳法或免疫抑制法测定同工酶谱,可定位损伤组织来源,提高诊断特异性。

检测参考标准

  1. 国内标准

    • WS/T 352-2011《血清乳酸脱氢酶催化活性浓度测定参考方法》
    • WS/T 404.5-2015《临床常用生化检验项目参考区间第5部分:血清乳酸脱氢酶》
  2. 国际标准

    • CLSI EP05-A3《Evaluation of Precision of Quantitative Measurement Procedures》
    • IFCC(国际临床化学联合会)推荐的LDH测定标准化方案

检测方法及相关仪器

  1. 常用检测方法

    • 比色法(终点法):基于NAD+还原为NADH的吸光度变化(340 nm),适用于基层医疗机构。
    • 连续监测法(速率法):通过动态监测NADH生成速率计算酶活性,具有高灵敏度和自动化优势,符合ISO 15189标准。
    • 电泳法:利用琼脂糖凝胶电泳分离同工酶,结合染色和光密度扫描进行定量分析,特异性强但操作复杂。
  2. 主要检测仪器

    • 全自动生化分析仪:如罗氏Cobas c702、西门子ADVIA 2400,支持批量样本的LDH活性检测,通量达800测试/小时。
    • 电泳仪:包括Helena REP系统、Sebia Hydrasys,用于同工酶分离分析。
    • 分光光度计:手动法检测的核心设备,需配合恒温水浴箱使用。
  3. 样本处理要求

    • 采集静脉血3-5 mL,避免溶血(红细胞内LDH浓度约为血清的150倍)。
    • 血清分离需在采血后2小时内完成,2-8℃保存可稳定7天,-20℃长期保存。

质量控制与结果解读

实验室需遵循WS/T 641-2018《临床检验定量测定室内质量控制》要求,每日使用两个浓度质控品(如伯乐UN1557/UN1558)监控检测系统性能。对于异常结果(如LDH>1000 U/L),需排除溶血干扰并建议复查。值得注意的是,剧烈运动、妊娠晚期及部分药物(如他汀类)可能引起LDH生理性升高,需结合临床背景综合判断。

总结

作为组织损伤的敏感指标,LDH检测在多种疾病的诊疗中具有重要价值。随着检测技术的标准化和同工酶分析的普及,其在精准医学中的应用潜力将进一步释放。未来,LDH联合其他生物标志物(如高敏肌钙蛋白、NLRP3炎症小体)的多组学检测模式,有望为疾病早期诊断和个体化治疗提供更全面的信息支持。